光學顯微鏡使用的光源種類

  在現代光學顯徽鏡中經常使用的除低壓鎢燈外，還有高壓汞燈和高壓傲燈，下面就這幾種光源的發射光譜分布、性能及其應用做一簡要的敘述和比較。

低壓鎢燈

    帶有可調變壓器的低壓鎢燈使用方便，并且價格也比較便宜，它能夠為很多顯徽鏡的觀察和照相提供滿意的光產量。然而這種鎢燈具有一些典型的缺點，在某些場合這些缺點暴露得如此明顯，以至于不得不去尋找其他的光源。低壓鎢燈所發射的光能有一個對顯微鏡非常不利的光譜分布，其zui大部分是在紅外光或不可見的熱輻射區域，在低于750nm的可見光區域發射的光主要是較長波長的光線，在鴿燈使用超高壓的情況下，在可見光范圍內的光產量會有一些增加，但是這會相應地降低燈泡的壽命，并且在光產量上的增加也是不穩定的。

鎢燈所涉及的另一個問題是燈泡會在使用中逐漸變暗，這是由于從發熱的燈絲上蒸發的鎢會沉積在燈泡的內表面上，結果引起光產量的逐漸降低和發射光能譜分布的變化。近些年來所出現的鎢鹵燈可以認為是對低壓鎢燈的一項有效的改進，這種燈在玻璃燈泡內充滿著與鎢暫時結合的鹵素氣體（例如碘），從加熱的燈絲上以氣體的形式發散出來，然后被限制的鎢重新沉積在燈絲上，鹵素氣體又被釋放出來并再次循環往復。由于這種燈具有用于顯微鏡中鎢燈的zui高光產量和長達數千小時的燈泡壽命，因此已經非常普迫地應用于顯微鏡中，特別是顯徽照相中。但是由于這種燈的燈絲小而密集，燈絲的沮度很高，可以達到3,000^-3,1001，因此它們發射出大盤的熱t，燈室僻要用通風孔來冷卻，并且需要用吸熱濾片吸收部分熱量。

離壓汞燈

這是一種由石英制成的在放電筒內兩個高壓電極之間發射汞的氣體放電燈，與鎢燈的連續光譜相反，它在可見光范圍內有更加分散的帶狀光譜，在一條比較低的連續的基部上在一定的波長部位益加著窄而高的發射帶（圖5 , 9 I   ）由于它在546, 436和

365nm波長有特殊的發射高峰，因此通過選擇濾光片進行選擇時，對于熒光顯微鏡說是一種非常有效的光源。但由于帶狀光譜的限制，不能使染色切片得到好的反差，盡管如此，它仍然是一個在光譜的zui佳部分具有相當大光能發射的良好光源。

高壓氣體放電燈

這是一種發射氮氣的比較新型的氣體放電燈，它有更多的優點。在可見光范圍內具有連續發射光譜，在紫外光部分有一定的發射連續光譜。在今天被認為是有效的通用光源同時這種高壓敘燈能夠穩定地提供極高的亮度，因此它是一種zui先進的光源，并且在一些特種顯微鏡中有著不可替代的地位。

熒光顯微鏡使用的光源種類

熒光顯微鏡是以紫外線為光源， 用以照射被檢物體， 使之發出熒光， 然后在顯微鏡下觀察物體的形狀及其所在位置。

熒光顯微鏡用于研究細胞內物質的吸收、運輸、化學物質的分布及定位等。 細胞中有些物質，如葉綠素等，受紫外線照射后可發熒光;另有一些物質本身雖不能發熒光，但如果用熒光染料或熒光抗體染色后，經紫外線照射亦可發熒光，熒光顯微鏡就是對這類物質進行定性和定量研究的工具之一。

下面讓我們來了解一下熒光顯微鏡的光源

多采用200W的超高壓汞燈作光源，它是用石英玻璃制作，中間呈球形，內充一定數量的汞，工作時由兩個電極間放電，引起水銀蒸發，球內氣壓迅速升高，當水銀完全蒸發時，可達50~70個標準大氣壓力，這一過程一般約需5~15min。超高壓汞燈的發光是電極間放電使水銀分子不斷解離和還原過程中發射光量子的結果。它發射很強的紫外和藍紫光，足以激發各類熒光物質，因此，為熒光顯微鏡普遍采用。

 超高壓汞燈也散發大量熱能。因此，燈室必須有良好的散熱條件，工作環境溫度不宜太高。

新型超高壓汞燈在使用初期不需高電壓即可引燃，使用一些時間后，則需要高壓啟動(約為15000V)，啟動后，維持工作電壓一般為50~60V，工作電流約4A左右。200W超高壓汞燈的平均壽命，在每次使用2h的情況下約為200h，開動一次工作時間愈短，則壽命愈短，如開一次只工作20min，則壽命降低50%。

因此，使用時盡量減少啟動次數。燈泡在使用過程中，其光效是逐漸降低的。燈熄滅后要等待冷卻才能重新啟動。點燃燈泡后不可立即關閉，以免水銀蒸發不完全而損壞電極，一般需要等15min。由于超高壓汞燈壓力很高，紫外線強烈，因此燈泡必須置燈室中方可點燃，以免傷害眼睛和發生爆炸。

超高壓汞燈(100W或200W)光源的電路和包括變壓、鎮流、啟動幾個部分。在燈室上有調節燈泡發光中心的系統，燈泡球部后面安裝有鍍鋁的凹面反射鏡，前面安裝有集光透鏡。

如何正確使用光學顯微鏡

1、將顯微鏡放在一個相對平穩的臺面上，建議可朝向寬大的窗戶，光線不好的情況下，建議可用白熾燈或日光燈作光源，以增強照明效果；

2、將低倍接物鏡轉到鏡筒正下方，使其距載物臺約1cm左右。再使聚光器上升到高，光圈也放到大，然后一邊從接目鏡觀察，一邊轉動反光鏡，使光源的光盡可能多的反射到聚光器上，如顯微鏡已有光源配備，這一步則可以免去；

3、取一滴水滴在干凈的載玻片上，再加上蓋玻片，同時用吸水性較強的紙將載玻片上的水吸干，以供顯微鏡觀察實用；

4、將載玻片放置于顯微鏡載物臺上，將要觀察的樣品放置于低倍鏡的正下方，然后緩慢降下鏡筒，同時使鏡頭距離載玻片約0.3cm左右，再收小光圈，降下聚光器，使照明亮度強弱更為適宜

5、采用目鏡觀察，適度移動載玻片。這時，鏡筒只能上升，不能下降，否則可能會壓碎載玻片。同時當觀察到影象并能隨載玻片移動而移動時，這就是所要觀察的對象.