GFP激發光源熒光濾光片的作用
GFP激發光源主要是通過光源內置的光源發光,濾光片將發出的光隔離成窄波段的激發光激發熒光蛋白發光。熒光濾光片在熒光蛋白激發光源,生命科學儀器的關鍵元件,我們習慣熒光系統的各種濾光片統稱為熒光濾光片,該鏡片是由3個不同的濾光片組成的,主要有有激發濾光片,透過(發射)濾光片和二向色濾光片組成的。其中激發濾光片及發射濾光片是窄帶通型濾光片,光譜是較窄的通帶,一般8nm-10nm左右。
GFP激發光源的熒光濾光片主要是為了獲得熒光能量或獲得熒光成像,熒光濾光片特點是對干擾光的隔離度好,自發熒光干擾少。目前廣泛用于PCR分析儀,熒光免疫分析儀,熒光顯微鏡等各種分析和檢測儀器中都會用到熒光濾光片。
GFP激發光源的熒光濾光片
熒光蛋白激發光源激發濾光片的作用:
在熒光檢測系統中,激發熒光的波長可通過的濾光片,現在采用帶通濾光片,用于生命科學和生物醫學領域,主要作用是在生物醫學熒光檢驗分析系統中分離和選擇物質的溦發光與發射光的特征波段光譜。
熒光蛋白激發光源發射濾光片的作用:
發射濾光片選擇并傳輸樣本發出的熒光特征,其他波段光線截止。發射光的波長比激發光的波長要長。我們選擇熒光發射濾光片可以選擇帶通濾光片或者長波通濾光片作為發射濾光片。
熒光蛋白激發光源二向色濾光片的作用:
或稱二色鏡或分色鏡,在檢測系統的光路呈45°角放置。二向色濾光片反射一種激發光并且透射發射光,激發光的反射率大于90%,發射光的透射率大于90%。光譜中不能透過的部分被反射而不是被吸收,濾光片在透射光和反射光下的顏色互為補色,因而又稱二向色濾光片。
熒光顯微鏡的熒光濾光片模組
GFP激發光源熒光濾光片的選型:
GFP激發光源熒光濾光片濾光片選型的一般原則是在成像端盡可能讓熒光,發射光透過,同時盡可能阻擋激發光,從而獲得高信噪比信號。一般會建議激發濾光片和發射濾光片的透射光譜有一定的距離,上海峰志儀器推薦選擇8nm-12nm帶寬。
我們在判斷濾光片的參數一般會看透射率光譜,但往往熒光相對于激發光的強度非常弱,因此選擇濾光片更需要參考阻擋深度光譜圖,OD值,OD值更能直觀地反映濾光片對光的阻擋特性。在選擇激發濾光片和發射濾光片時,兩者的阻擋深度光譜交點(OD交點)是重要的判斷標準,一般要求寬場光源激發時交點OD值大于5,激光激發時大于OD6,以實現較好的熒光信噪比。
上海峰志儀器銷售的熒光蛋白激發光源熒光濾光片組,具有以下濾光片特點:
波長精準;
高信噪比;
深截止度;
高可靠性;
產品定制化程度高;
GFP熒光蛋白激發光源濾光片劃傷或擦傷是怎么產生的?
GFP激發光源濾光片的劃傷或擦傷的定義和說明:濾光片玻璃表面和其它較硬的物質相對滑動或磨擦造成的線狀或帶狀的傷痕為劃傷或擦傷,主要表現為劃傷或擦傷部位的濾光片透光率增高,或濾光片膜面脫落透亮。劃傷部位形態多為不規則的弧形細條狀或帶狀。
GFP激發光源劃傷或擦傷產生原因主要有以下幾點:
1、濾光片生產方面:由于設備或后清洗的原因,在濾光片生產中是存在濾光片劃傷可能性的,但這種劃傷一般為規則的和直線型的,是能控制和檢驗出來的。另外,生產過程中對濾光片鍍膜玻璃的搬運、裝箱也是有可能造成劃傷的,原片本身也可能存在劃傷。
2、濾光片切割原因:比如切割在濾光片膜面的拖動;因濾光片膜面上有砂粒或玻璃屑等,濾光片擦拭過程中造成的膜面的擦傷;濾光片鍍膜面朝下切割或沒注意到每箱的zui后一片是反方向放置等原因,致使濾光片膜面與其他摩擦而造成劃傷。
3、濾光片堆放和存放:濾光片開箱后或切割后的濾光片沒有按要求堆放,片于片之間沒有墊任何襯墊物,導致濾光片之間直接接觸,在搬運或運輸過程中造成劃傷或濾光片擦傷。
4、濾光片安裝和清洗:濾光片在安裝中人為原因造成的因硬物的劃傷或擦傷;在濾光片清洗中使用了不干凈或較硬的擦拭物,或是在濾光片膜面有污染物,而使用了不正確的清潔方法。
通過GFP激發光源的濾光片觀測到熒光
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